液相色谱仪色谱柱保留时间变化有两种情况:*种是同一根柱样品间的保留变化;第二种是不同柱之间的保留变化。第二种类型主要是填料的差异造成的,许多实验室都会碰到。
不同牌号的液相色谱仪色谱柱分离的色谱峰包里时间可能在一定范围内移动,但通常峰的顺序和分辨率不变,可通过调整流速或溶剂强度进行校正,如果谱图中色谱峰顺序发生了变化,或者两峰重叠在一起,问题就比较严重,更换原来品牌的色谱柱。
液相色谱仪色谱柱保留时间发生大的变化,主要由柱填料硅醇基相互作用或者比表面积、碳含量差异较大所致,另外有次级保留因素的影响。硅胶为基质的填料表面含有硅醇,有的封尾填料可去掉硅醇,不封尾填料的硅胶表面硅醇基更多。酸性或碱性分子可与硅醇基发生不同程度的相互作用。硅醇基与样品分子作用的强弱,因不同批号的硅胶和不键合相填料而异。即使同批号的硅胶而不同批号的键合相也有差异。硅醇基对阳离子或碱性样品影响zui大。