反相色谱是迄今在高效液相色谱中应用*广泛的技术，主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和很多的可离子化的及离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相本质上都是疏水物质，因此，分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小程度来分离的，样品基体中其它疏水杂质组分也能以同样的方式保留。
反相色谱柱是一种常用的色谱柱产品，主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成，被广泛用于多个领域中。在反相色谱柱的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性，延长柱子的使用寿命非常重要。使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化，如不采取措施，将会缩短色谱柱的使用寿命，影响工作效率，并造成一定的经济损失。
反相色谱柱在使用缓冲液的过程中还要注意以下几点：
1、避免使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用；
2、缓冲液要现配现用，往往缓冲液是良好的菌类培养液，隔天或放置长时间实验时会发生很多怪现象；
3、使用缓冲液要及时掌握pH范围，做到胸中有数；
4、清洗液路和柱子时，有温控可加热到30摄氏度易于冲洗；
5、长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出，若有白色盐类析出，定期用10%硝酸冲洗液路可以避免液路的堵塞；
6、选择缓冲液要用的试剂，避免不纯的盐类造成不必要的麻烦；
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