凝胶渗透色谱仪是一种常用的分离和纯化生物大分子的工具。它基于凝胶过滤原理,通过不同孔径大小的凝胶粒子,将待分离混合物中的分子按照其分子量大小分离开来。
凝胶渗透色谱仪由样品进样系统、流动相系统、柱体和检测器组成。首先,待测样品被注射到样品进样系统中,然后被输送到柱体中。柱体内填充有大小不同的凝胶颗粒,这些凝胶颗粒构成了一个分子筛。样品分子在流动相的推动下进入凝胶颗粒内部,越小的分子会更容易穿过凝胶颗粒孔隙,而较大的分子则会受限于凝胶颗粒的孔隙,因此会留在凝胶颗粒外面形成一个分子堆积层。这样,在柱体里就可以将不同分子大小的物质进行有效地分离。
检测器通常采用紫外吸收检测器,可以根据样品分子的不同特性来选择适当的波长进行检测。通过分析检测器输出的信号,我们可以确定分子的分子量大小以及其在样品中的相对含量。
凝胶渗透色谱仪广泛应用于多种生物大分子的分离和纯化,如蛋白质、DNA、RNA等。它具有操作简便、分离精度高、分离速度快等优点,是生物学和生物化学领域重要的工具之一。